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色谱柱的正确使用和维护是十分重要的
点击次数:1974 更新时间:2019-10-18
  色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题:
 
 ?、佟”苊庋沽臀露鹊募本绫浠叭魏位嫡鸲?。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述)。
 
  ② 应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。
 
  ③ 一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
 
 ?、堋⊙≡袷褂檬室说牧鞫啵ㄓ绕涫莗H),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
 
 ?、荨”苊饨矢丛拥难酚绕涫巧镅分苯幼⑷胫?,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一?;ぶ?。?;ぶ话闶翘钣邢嗨乒潭ㄏ嗟亩讨?。?;ぶ梢远矣Ω镁8?。
 
 ?、蕖【S们咳芗脸逑瓷字?,清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml。
 
  ⑦ 保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。
 
 ?、唷∩字褂霉讨?,如果压力升高,一种可能是烧结滤片被堵塞,这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进入柱内,使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。